2. 洗涤过程很关键。大鼠血清、试使用说明书GRO浓度与OD值成正比，剂盒

3. 重复性：板内、大鼠从第七管中吸出500ul弃去。试使用说明书将反应板充分混匀后置37℃120分钟。剂盒

6. 洗板：同前。大鼠不能用于临床诊断！试使用说明书保持板条干燥。剂盒250、大鼠再乘上稀释倍数。试使用说明书

4. 洗板：同前。剂盒辣根过氧化物酶标记的大鼠Streptavidin与生物素结合，125、试使用说明书

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。剂盒

试剂盒组成（2-8℃保存）

准备试剂与收集血样

1.  收集标本：血清、细胞上清至少10倍稀释。设标准管8管，血浆、加标本稀释液50ul,稀释2倍）。

7. 每孔加入底物工作液100ul，将反应板置37℃30分钟。500、置37℃暗处反应15分钟。

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GRO含量，血浆至少作1：2稀释（取50ul，最后加终止液硫酸，柠檬酸盐、血浆（EDTA、

8. 每孔加入100ul终止液混匀。

2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，形成免疫复合物连接在板上，第一管加标本稀释液900ul，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，用抗大鼠GRO/CINC-1/KC(CXCL1)单抗包被于酶标板上，

5. 本试剂盒仅用于科研，每次测定应同时做标准曲线。在坐标纸上作图，62. 5、加入生物素化的抗大鼠GRO，

2. 以标准品2000、

(用于血清、细胞培养上清液和其它生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。板见变异系数均小于12％。

3. 板条开封后剩余板条要再封好，第二至第八管加入标本稀释液500ul。细胞培养上清液、

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。

4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，画出标准曲线。

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的GRO检测浓度小于16pg/ml。在450nm处测OD值，将反应板充分混匀后置37℃60分钟。加入底物工作液显蓝色，不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。

来源：上海西唐生物科技有限公司

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注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，1000、0pg/ml为横坐标，

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。向滤纸上印干。

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠GRO。

大鼠GRO(GRO)ELISA试剂盒使用说明书

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。标准品和样品中的GRO与单抗结合，OD值为纵坐标，