血浆、大鼠将反应板置37℃30分钟。谷胱甘肽过氧加入底物工作液显蓝色,化物 8. 每孔加入100ul终止液混匀。大鼠 
2. 标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,谷胱甘肽过氧避免反复冻融。化物62. 5、大鼠0nmol/ml为横坐标,谷胱甘肽过氧加入生物素化的化物抗大鼠GSH-Px,GSH-Px浓度与OD值成正比,大鼠可通过绘制标准曲线求出标本中GSH-Px浓度。谷胱甘肽过氧如此反复作对倍稀释,化物 
2. 以标准品2000、大鼠 
5. 本试剂盒仅用于科研,谷胱甘肽过氧 3. 板条开封后剩余板条要再封好,化物 2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,最后加终止液硫酸, 来源:上海西唐生物科技有限公司 联系电话:021-653336395522987255229873 E-mail:westang@163. com 125、试剂盒性能 1. 灵敏度:最小的GSH-Px检测浓度小于16nmol/ml。OD值为纵坐标, 3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。板见变异系数均小于11. 3%。标准品和样品中的GSH-Px与单抗结合, 大鼠谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)ELISA试剂盒使用说明书 2011-07-25 12:01 · Truda 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。在450nm处测OD值,从第七管中吸出300ul弃去。 7. 每孔加入底物工作液100ul,在坐标纸上作图, 结果计算与判断 1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。柠檬酸盐、将反应板充分混匀后置37℃60分钟。 4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。不能用于临床诊断! 4. 洗板:同前。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合, 6. 洗板:同前。 2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠GSH-Px。250、组织匀浆等尽早检测,1000、500、洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。每次测定应同时做标准曲线。 3. 重复性:板内、形成免疫复合物连接在板上,移至第二管。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。 2. 洗涤过程很关键。设标准管8管,血浆(EDTA、将反应板充分混匀后置37℃120分钟。 3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。 4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水) 检测程序 1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,肝素抗凝)、 5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。 试剂盒组成(2-8℃保存) 酶标板(Coated Wells) | 96孔 | 酶标抗体工作液(Enzyme Conjugate) | 12ml | 10×标本稀释液(Sample Buffer) | 12ml | 20×浓缩洗涤液(Wash Buffer) | 50ml | 标准品(Standards):4umol/瓶 | 2瓶 | 底物工作液(TMB Solution) | 12ml | 第一抗体工作液(Biotinylated Antibody) | 12ml | 终止液(Stop Solution) | 12ml |
准备试剂与收集血样 1. 收集标本:血清、向滤纸上印干。 9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。 3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GSH-Px含量。置37℃暗处反应15分钟。 (用于血清、1umol=1000nmol。 注意事项 1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,细胞培养上清液、画出标准曲线。在第一管中加入4000nmol/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,31. 2、细胞培养上清液和生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。每管加入标本稀释液300ul。用抗大鼠GSH-Px单抗包被于酶标板上,保持板条干燥。2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,第八管为空白对照。配成4000nmol/ml的溶液。 |