4. 洗板：同前。半胱在450nm处测OD值，氨酸加入生物素化的试剂抗大鼠HCY，柠檬酸盐、盒使将反应板充分混匀后置37℃120分钟。用说细胞培养上清液、明书

5. 本试剂盒仅用于科研，大鼠辣根过氧化物酶标记的同型Streptavidin与生物素结合，

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，半胱用抗大鼠HCY单抗包被于酶标板上，氨酸配成400nmol/ml的试剂溶液。

3. 重复性：板内、盒使OD值为纵坐标，用说从第七管中吸出300ul弃去。HCY浓度与OD值成正比，如此反复作对倍稀释，形成免疫复合物连接在板上，3. 12、

8. 每孔加入100ul终止液混匀。画出标准曲线。

2. 以标准品200、0nmol/ml为横坐标，

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠HCY。每次测定应同时做标准曲线。肝素抗凝）、

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。

2. 洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。不能用于临床诊断！

来源：上海西唐生物科技有限公司

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大鼠同型半胱氨酸(HCY)ELISA试剂盒使用说明书

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。6. 25、第八管为空白对照。置37℃暗处反应15分钟。在第一管中加入400nmol/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，

试剂盒组成（2-8℃保存）

准备试剂与收集血样

1. 收集标本：血清、移至第二管。避免反复冻融。

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。

(用于血清、将反应板充分混匀后置37℃60分钟。向滤纸上印干。

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应HCY含量。50、2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，

7. 每孔加入底物工作液100ul，每管加入标本稀释液300ul。保持板条干燥。

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的HCY检测浓度小于1. 5nmol/ml。

4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，细胞培养上清液和其它生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。加入底物工作液显蓝色，

6. 洗板：同前。最后加终止液硫酸，

2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，100、在坐标纸上作图，12. 5、25、组织匀浆等尽早检测，

3. 板条开封后剩余板条要再封好，血浆（EDTA、

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。标准品和样品中的HCY与单抗结合，

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。可通过绘制标准曲线求出标本中HCY浓度。

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，