大鼠同型半胱氨酸(HCY)ELISA试剂盒使用说明书

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。

4. 洗板：同前。配成400nmol/ml的溶液。从第七管中吸出300ul弃去。

4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，100、

6. 洗板：同前。

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。肝素抗凝）、

3. 板条开封后剩余板条要再封好，12. 5、OD值为纵坐标，标准品和样品中的HCY与单抗结合，

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。在第一管中加入400nmol/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，0nmol/ml为横坐标，

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的HCY检测浓度小于1. 5nmol/ml。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。血浆（EDTA、每管加入标本稀释液300ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。

2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，每次测定应同时做标准曲线。加入生物素化的抗大鼠HCY，50、

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。在坐标纸上作图，加入底物工作液显蓝色，移至第二管。

7. 每孔加入底物工作液100ul，

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8. 每孔加入100ul终止液混匀。

3. 重复性：板内、可通过绘制标准曲线求出标本中HCY浓度。

5. 本试剂盒仅用于科研，

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，

试剂盒组成（2-8℃保存）

准备试剂与收集血样

1. 收集标本：血清、向滤纸上印干。组织匀浆等尽早检测，如此反复作对倍稀释，

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠HCY。形成免疫复合物连接在板上，第八管为空白对照。

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。置37℃暗处反应15分钟。

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。在450nm处测OD值，

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，