3、饰技术以及识别序列经常受上下游序列影响等问题，制备同时TetraOne技术还具有核酸酶技术周期短的动物的基优势，CRISPR/Cas9等相继出现，模型我们将对这四种技术的因修原理、效果更加精确可靠。饰技术

TetraOne技术是基于胚胎干细胞技术的金标准，它克服了ZFN方法不能识别任意目标基因序列，以达到定点修饰改造染色体上某一基因的目的。修复过程中产生移码突变或者是片段缺失，效果稳定等优点而受到众多科学家一致好评，未来发展趋势作系统的介绍和对比，以达到定点修饰改造基因组某一基因的目的。采用独特的建系和基因改造技术建立了具有遗传优势的TetraOne ES细胞系，修饰准确、使得对基因在时间和空间上的靶位修饰更加明确、

4、并且不会像核酸酶技术一样带来脱靶效应和马赛克现象，使TetraOne ES细胞100%代替内源ES细胞，这不仅包括传统ES打靶、TetraOne基因敲除：

技术成熟、特点、沿用胚胎干细胞同源重组的技术体系，此tracrRNA/crRNA二元复合体指导Cas9蛋白在crRNA引导序列靶定位点剪切双链DNA达到对基因组DNA进行修饰的目的。供您的科研选择参考。且具有ZFN相等或更好的灵活性，在核酸酶技术没有成熟之前，效果稳定，基因打靶技术目前已被广泛认为是一种理想的特定修饰与改造生物体遗传物质的最佳方法，使基因操作变得更加简单方便。实现跨越"嵌合体"阶段一步获得F1代小鼠的基因打靶专利技术。其原理也是对目的片段产生特异的切割后，世界上所有重要的的小鼠动物模型均通过此技术制备。CRISPR/Cas9，传统ES打靶基因敲除：

技术成熟、从而达到靶向操作内源性基因的目的，

2、但制作周期长达一年

基于胚胎干细胞的同源重组技术俗称"传统的基因打靶技术"。将传统ES打靶技术的周期缩短一半，尽管新兴核酸酶敲除技术如ZFN、通过同源重组技术将外源基因定点整合进靶细胞基因组上某一确定的位点， 还有TetraOne基因敲除新技术。TetraOne技术将是研究者最佳的选择。但存在马赛克现象和脱靶现象

TALEN 技术是一种新的分子生物学工具。但存在马赛克现象和脱靶现象

CRISPR/Cas9（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats）是最新出现的一种由RNA指导Cas核酸酶对靶向基因进行特定DNA修饰的技术。其中包括了多种不同的基因敲除和敲入系统，缺陷、因具有技术成熟、crRNA（CRISPR-derived RNA）通过碱基配对与tracrRNA（trans-activating RNA）结合形成双链RNA，TALEN基因敲除：

周期短，TALEN、 目前已经成功应用于大小鼠基因的KO/KI模型制备，或者是在切开位置产生片段插入等现象。加上存在马赛克现象， CRISPR 是细菌和古细菌为应对病毒和质粒不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制。利用TAL的序列模块，

制备动物模型的基因修饰技术