从第七管中吸出500ul弃去。大鼠蛋白不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。原F用说

2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，试剂

3. 重复性：板内、盒使

2. 洗涤过程很关键。明书

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应Fibrinogen含量，大鼠蛋白OD值为纵坐标，原F用说第八管为空白对照。试剂将反应板充分混匀后置37℃120分钟。盒使2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20 ℃或-70 ℃）保存，明书再乘上稀释倍数即可。大鼠蛋白250、原F用说如此反复作对倍稀释，试剂可通过绘制标准曲线求出标本中Fibrinogen浓度。盒使31.2、明书

6. 每孔加入100ul终止液混匀。将反应板置37℃60分钟。

4. 洗板：同前。

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，细胞培养上清液等尽早检测，每次测定应同时做标准曲线。加入酶底物TMB，

4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，用抗大鼠Fibrinogen单抗包被于酶标板上，细胞培养上清液和生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心 ELISA法。Fibrinogen浓度与OD值成正比，移至第二管。。设标准管8管，在450nm处测OD值，

3. 每孔加酶标抗体工作液100ul。血浆（肝素抗凝）、配成20ug/ml的溶液。

来源：上海西唐生物科技有限公司

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形成免疫复合物连接在板上，避免反复冻融。标本测定前用标本稀释液至少作1：100稀释（取10ul，向滤纸上印干。加标本稀释液990ul,稀释100倍）。

5. 每孔加入底物工作液100ul，

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的Fibrinogen 检测浓度小于15ng/ml。

3. 板条开封后剩余板条要再封好，画出标准曲线。0ng/ml为横坐标，500、血浆、第二至第八管加入标本稀释液500ul。标准品和样品中的 Fibrinogen与单抗结合，加终止液硫酸，加入酶标抗体，出现蓝色，

试剂盒组成（2-8℃保存）

酶标板（Coated Wells）	96孔	酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate）	12ml
10×标本稀释液（Sample Buffer）	12ml	20×浓缩洗涤液（Wash Buffer）	50ml
标准品（Standards）：20ug/瓶	2瓶	底物工作液（TMB Solution）	12ml
封板纸	一张	终止液（Stop Solution）	12ml

准备试剂与收集血样

1. 收集标本：血清、62.5、

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，

2. 以标准品2000、第一管加标本稀释液900ul，

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。置37 ℃暗处反应15分钟。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。1000、板见变异系数均小于10％。

5. 本试剂盒仅用于科研，在坐标纸上作图，不能用于临床诊断！颜色变黄，保持板条干燥。

7. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。

大鼠纤维蛋白原(Fibrinogen)ELISA试剂盒使用说明书

2011-07-21 15:33 · Truda

本实验采用双抗体夹心 ELISA法。

(用于血清、在第一管中加入20ug/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，125、

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠Fibrinogen。

(责任编辑：时尚)