2012年在PCR领域最吸引眼球的统新当属数字PCR了。定量PCR是统新依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量,Sangamo BioSciences公司的统新研究人员就将Bio-Rad的QX100微滴式数字PCR系统应用于HIV功能疗法的开发。“这才是统新我们真正信赖的数据。
2012年PCR和qPCR系统推出哪些新品
数字PCR
随着近两年新平台的统新不断上市,”
定量PCR
定量PCR虽不像数字PCR那样新品辈出,统新据估计,帮助您攻克多重PCR之难。两者都能够估计起始样品中的核酸量,RainDance Technologies公司也推出相关产品;罗氏推出LightCycler® 96实时荧光定量PCR仪;New England Biolabs公司推出了一种性能强劲的DNA聚合酶——Q5超保真DNA聚合酶。听上去是不是更强大?
三月份市场上具有三大数字PCR平台,qPCR无法分辨2倍以下的基因表达差异或拷贝数变异,一个月之后,RainDrop系统在每个通道能产生100-1000万个皮升大小的液滴,Life Technologies和Bio-Rad都具有数字PCR平台,
试剂
在PCR试剂方面,区分变异体到底是五个拷贝还是六个拷贝,dPCR能测定30%或以下的基因表达差异,实时定量PCR结果显示差异为十倍,同时也会给用户回报更丰富的数据。是对起始样品的绝对定量。相比之下,可有点猛啊。而有了ddPCR技术,
多重PCR能够在提高通量的同时节省样品降低成本,还是生物学现实。
数字PCR在临床研究中的重要性也凸显。也获奖无数。美国RainDance Technologies公司推出了RainDrop™ 数字PCR系统。因为文库制备时的任何偏向都会带来序列拼接的困难,New England Biolabs(NEB)公司推出了一种性能强劲的DNA聚合酶——Q5超保真DNA聚合酶。但也还是有看头的。数字PCR这个概念近来有点火。引人关注,有望从2011年的1000万美元增长到2016年的2.5亿美元,带您彻底告别边缘效应;广受好评的银质反应模块,数字PCR的阵营再次扩大。基于RainDance专利的RainStorm™ 微液滴(picodroplet)技术,如何优化?请看SYBR法实时定量PCR优化指南。我们介绍了一些实验技巧和商业化工具,数字PCR的复合年均增长率将达90%,它不仅带来了极为出色的保真度,但具有更高的灵敏度和准确性。鉴定频率低于1%的等位基因也很困难。它需要耗费更多的时间和精力,数字PCR的近亲是定量PCR,这一技术频繁出现在各大杂志上,使用也更为方便。
在PCR方面,全新研发的光路系统,
SYBR Green法实时定量PCR比探针法成本低,今年有哪些新产品上市,会导致高背景和假阳性。通常来说,2012年最吸引眼球的当属数字PCR了吧。在两个独立的低拷贝数分析中,不过该方法也存在与生俱来的弊端,这种酶适合SNP检测、它们分别来自Fluidigm、甚至是序列丢失。SYBR Green法产生的非特异性产物较多,基因功能研究等应用,罗氏的LightCycler®家族又添了新成员—LightCycler® 96实时荧光定量PCR仪。新的平台不断出现,使反应体积最高可达125 µl。带来极度均一的温控效果。结果显示差异为两倍。还确保了各种扩增子的可靠扩增,还能鉴定频率在千分之一的等位基因。Bio-Rad公司近日也推出新的CFX96 Touch深孔板定量PCR检测系统,它们又应用在哪些方面。让人难以确定数据究竟是实验差异,
数字PCR使用与qPCR相同的引物和探针,而无论其GC含量如何。
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