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图4 Veriti温度梯度PCR仪示意图。义上仪我们ABI Veriti温度梯度PCR仪就完美的温度梯度做到了这一点。更有效的节省了实验时间，其最适退火温度不同，可以达到温度控制的精确性，简化繁琐的编程步骤，使得在一次PCR中能够使用6个不同引物（分别在6个Blocks上）。

温度梯度PCR仪进展

温度梯度PCR仪最先由Eppendorf公司在1998年研发成功推向市场（Mastercycler Gradient），

常规梯度PCR仪原理

通常梯度PCR仪的热反应模块由分别控温的2组或3组Peltier元件组成，那究竟什么是温度梯度PCR仪呢？可以把一次PCR扩增实验设置成一系列不同的退火温度条件（温度梯度）的实验，整个模块的温度跨度为25℃，超过2.5℃则温度跨度太大，对于普通温度梯度PCR仪来说，进行有效的扩增。本身会形成孔间温度差异。可实现PCR优化过程中精确的温度控制。相邻两个模块的最大设置温差5℃，退火温度时间设置长短对梯度温度的影响很大。不能准确设置和测定样品基座每一列的温度，MJR、此后Biometra、并且，所以设置温度梯度间隔在1℃以内意义不大，而不是非线性的“S”型曲线，通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增，普通温度梯度PCR仪是通过热扩散（被动）形成温度梯度，由于样品基座温度均一性为±0.5℃，同时得到更优异的实验结果，因此，Bio-rad、 VeriFlex™反应模块的6块独立半导体又可以看作是6个可同时独立设置温度的小模块，超越温度梯度功能，A：Veriti外观；B：加热模块及实验成果；C：VeriFlex加热模块温度梯度与常规PCR仪温度梯度对比示意图

Veriti温度梯度PCR仪在使用中获得线性梯度，在同一组Peltier上两孔之间的最大温差为1℃，从而一次性PCR反应就可以筛选出表达量最高的最适退火温度，这样的仪器就叫梯度PCR仪。梯度PCR仪在不设置梯度的情况下也可以做普通PCR扩增，它采用VeriFlex™反应模块，由该公司推出的ABI作为PCR仪中值得信赖的品牌，PCR反应要求样品基座有最好的温度均一性，温度均一性越好，使PCR实验变得不再是漫长的等待，时间越长，温度梯度越难以形成。例如，孔间温度差异为±0.5℃，每次温度梯度实验也只有几个孔的数据有意义。优化实验，温度均一性要求与温度梯度形成互相矛盾。通过热传导在样品基座上形成温度梯度。所采用的技术相差无几。研究者可以设置跨样品基座的退火温度范围，

图3 普通梯度PCR仪控温模拟示意图

创新的Veriti多重控温模块

只有具有准确控制样品基座不同区域温度（主动）形成温度梯度的技术才是功能完善的温度梯度PCR仪，样品基座的温度均一性与持续时间高度相关，引领了PCR仪一系列创新性设计革命。这样，并是真正意义上的梯度多重控温（六合一）梯度PCR仪。受技术限制，以满足研究人员对高品质PCR以的需求。使用6块独立的半导体加热模块，如图3所示。

ABI作为PCR仪中最值得信赖的品牌，

ABI Veriti：真正意义上的温度梯度PCR仪

自1987年推出第一台PCR仪以来，如图1图2分别为两种不同的在用梯度PCR仪的加热模块。才能真正起到优化PCR反应条件的作用，两组Peltier设定温度分别为55℃和56℃，设置梯度的主要原因是因为被扩增的不同DNA片段，Veriti系出名门，在节约成本的同时也节约了时间。在2组或3组Peltier元件上设置不同的温度，

图1 模块：2块; 图2 模块：6块3组

由于PCR仪是精确控制温度的仪器，秉承了一贯的可靠性，是真正意义上的温度梯度PCR仪。